1. 목적: 이 절차는 무균 작업과 무균실 보호를 위한 표준화된 절차를 제공하는 것을 목표로 합니다.
2. 적용범위 : 생물시험실
3. 담당자: QC Supervisor Tester
4. 정의: 없음
5. 안전수칙
미생물 오염을 방지하기 위해 무균 작업을 엄격히 수행해야 합니다. 작업자는 멸균실에 들어가기 전에 자외선 램프를 꺼야 합니다.
6. 절차
6.1. 무균실에는 무균 수술실과 완충실을 갖추어야 한다. 무균 수술실의 청결도는 Class 10000에 도달해야 한다. 실내 온도는 20~24°C, 습도는 45~60%로 유지해야 한다. 클린벤치의 청결도는 Class 100에 도달해야 한다.
6.2. 무균실은 청결을 유지해야 하며, 오염을 방지하기 위해 잔해물을 쌓아두는 것은 엄격히 금지되어 있습니다.
6.3. 모든 멸균 장비와 배양 배지의 오염을 엄격히 방지하십시오. 오염된 장비와 배양 배지는 사용을 중단해야 합니다.
6.4. 무균실에는 5% 크레졸 용액, 70% 알코올, 0.1% 클로르메티오닌 용액 등 작업 농도의 소독제가 구비되어 있어야 합니다.
6.5. 무균실은 정기적으로 살균하고 적절한 소독제로 청소하여 무균실의 청결이 요구 사항을 충족하도록 해야 합니다.
6.6. 멸균실로 반입해야 하는 모든 기구, 기구, 접시 및 기타 품목은 단단히 포장하고 적절한 방법으로 멸균해야 합니다.
6.7. 멸균실에 들어가기 전, 직원은 비누나 소독제로 손을 씻고, 완충실에서 특수 작업복, 신발, 모자, 마스크, 장갑으로 갈아입거나 70% 에탄올로 다시 손을 닦은 후 멸균실에 들어가야 합니다. 세균실에서 작업을 수행해야 합니다.
6.8. 멸균실 사용 전, 멸균실 내 자외선 램프를 켜서 30분 이상 조사 및 멸균해야 하며, 동시에 클린 벤치를 켜서 송풍해야 합니다. 작업 완료 후, 멸균실을 적절한 시기에 청소하고 자외선으로 20분간 멸균해야 합니다.
6.9. 검사 전, 시험 시료의 외부 포장은 손상되지 않도록 보관하고, 오염을 방지하기 위해 개봉해서는 안 됩니다. 검사 전, 70% 알코올 솜으로 외부 표면을 소독하십시오.
6.10. 각 작업마다 무균 작업의 신뢰성을 확인하기 위해 음성 대조 시험을 실시해야 합니다.
6.11. 박테리아 액체를 흡수할 때는 흡입 볼을 사용하여 흡수해야 합니다. 빨대를 입에 직접 대지 마십시오.
6.12. 접종 바늘은 매 사용 전후에 화염 소독해야 합니다. 배양액을 식힌 후 접종할 수 있습니다.
6.13. 빨대, 시험관, 페트리 접시 및 기타 세균액이 담긴 도구는 소독을 위해 5% 라이솔 용액이 담긴 살균통에 담가두고, 24시간 후에 꺼내어 헹궈야 합니다.
6.14. 테이블이나 바닥에 세균성 액체가 엎질러진 경우, 오염된 부위에 5% 카르볼산 용액이나 3% 라이솔 용액을 즉시 최소 30분 동안 붓고 처리해야 합니다. 작업복과 모자가 세균성 액체로 오염된 경우, 즉시 벗어 고압 증기 소독 후 세탁해야 합니다.
6.15. 살아있는 박테리아가 포함된 모든 물품은 수돗물에 헹구기 전에 소독해야 합니다. 하수구를 오염시키는 행위는 엄격히 금지되어 있습니다.
6.16. 멸균실의 콜로니 수는 매달 확인해야 합니다. 클린 벤치를 열고 내경 90mm의 멸균 페트리 접시 여러 개를 준비하여 녹여 약 45°C로 식힌 영양 한천 배지 약 15ml를 무균적으로 주입합니다. 굳힌 후 30~35°C의 인큐베이터에서 48시간 동안 배양합니다. 무균 상태가 확인되면 플레이트 3~5개를 작업 위치의 왼쪽, 가운데, 오른쪽에 놓습니다. 덮개를 열고 30분 동안 노출시킨 후 30~35°C의 인큐베이터에 뒤집어서 48시간 동안 넣고 꺼냅니다. 검사합니다. 클래스 100 청정 구역에서 플레이트의 잡균 평균 수는 1 콜로니를 초과해서는 안 되며, 클래스 10000 청정실에서 플레이트의 평균 수는 3 콜로니를 초과해서는 안 됩니다. 한도를 초과한 경우, 반복적인 검사를 통해 요구 사항을 충족할 때까지 무균실을 철저히 소독해야 합니다.
7. "약품 위생 검사 방법" 및 "중국 약품 검사 표준 운영 관행"의 (멸균 검사 방법) 장을 참조하십시오.
8. 유통부서: 품질관리부
클린룸 기술 지침:
무균 환경과 무균 재료를 확보한 후에는 특정 미생물을 연구하거나 그 기능을 활용하기 위해 무균 상태를 유지해야 합니다. 그렇지 않으면 외부의 다양한 미생물이 쉽게 혼합될 수 있습니다. 외부에서 관련 없는 미생물이 혼합되는 현상을 미생물학에서는 오염균이라고 합니다. 오염 방지는 미생물학 작업에서 중요한 기술입니다. 완벽한 멸균과 오염 방지는 무균 기술의 두 가지 측면입니다. 또한, 연구 대상 미생물, 특히 자연에 존재하지 않는 병원성 미생물이나 유전자 변형 미생물이 실험 용기에서 외부 환경으로 유출되는 것을 방지해야 합니다. 미생물학에서는 이러한 목적을 위해 다양한 조치를 취하고 있습니다.
멸균실은 일반적으로 미생물학 실험실에 특별히 설치된 작은 방입니다.시트와 유리로 만들 수 있습니다.면적은 너무 넓어서는 안 되며 약 4-5제곱미터이고 높이는 약 2.5미터여야 합니다.멸균실 밖에 완충실을 설치해야 합니다.완충실 문과 멸균실 문은 공기 흐름으로 인해 잡균이 들어오는 것을 방지하기 위해 같은 방향을 향하지 않아야 합니다.멸균실과 완충실은 모두 밀폐되어야 합니다.실내 환기 장비에는 공기 여과 장치가 있어야 합니다.멸균실의 바닥과 벽은 매끄럽고 먼지가 쌓이기 어렵고 청소가 쉬워야 합니다.작업 표면은 평평해야 합니다.멸균실과 완충실 모두 자외선 조명이 설치되어 있습니다.멸균실의 자외선 조명은 작업 표면에서 1미터 떨어져 있습니다.멸균실에 들어가는 직원은 살균된 옷과 모자를 착용해야 합니다.
현재 미생물학 공장에는 대부분 무균실이 설치되어 있으며, 일반 실험실에서는 클린 벤치를 사용합니다. 클린 벤치의 주요 기능은 층류 공기 흐름 장치를 사용하여 작업 표면의 미생물을 포함한 각종 미세 먼지를 제거하는 것입니다. 이 전기 장치는 공기가 헤파 필터를 통과하여 작업 표면으로 유입되도록 하여 작업 표면이 항상 무균 공기의 흐름에 의해 제어되도록 합니다. 또한, 외부 측면에는 고속 에어커튼이 있어 외부 세균 유입을 차단합니다.
환경 조건이 열악한 곳에서는 클린 벤치 대신 나무 멸균 상자를 사용할 수 있습니다. 멸균 상자는 구조가 간단하고 이동이 간편합니다. 상자 앞쪽에는 두 개의 구멍이 있으며, 사용하지 않을 때는 밀어서 여닫을 수 있는 문으로 막혀 있습니다. 작동 중에는 팔을 뻗을 수 있습니다. 앞쪽 윗부분은 내부 작동을 용이하게 하기 위해 유리로 되어 있습니다. 상자 내부에는 자외선 램프가 있으며, 측면의 작은 문을 통해 기구와 세균을 넣을 수 있습니다.
무균 조작 기술은 현재 미생물학 연구 및 응용 분야에서 중추적인 역할을 할 뿐만 아니라, 다양한 생명공학 분야에서도 널리 활용되고 있습니다. 예를 들어, 형질전환 기술, 단일클론 항체 기술 등이 있습니다.
게시 시간: 2024년 3월 6일