1. 목적: 이 절차의 목적은 무균 작업 및 무균실 보호를 위한 표준화된 절차를 제공하는 것입니다.
2. 적용 범위: 생물학적 테스트 실험실
3. 책임자: QC 감독관 테스터
4. 정의: 없음
5. 안전상의 주의사항
미생물 오염을 방지하기 위해 엄격하게 무균 작업을 수행합니다. 작업자는 멸균실에 들어가기 전에 UV 램프를 꺼야 합니다.
6.절차
6.1. 무균실에는 무균 수술실과 완충실을 갖추어야 한다. 무균 수술실의 청결도는 10000등급에 도달해야 하며, 실내 온도는 20~24°C, 습도는 45~60%를 유지해야 합니다. 클린벤치의 청정도는 100등급에 도달해야 합니다.
6.2. 무균실은 청결하게 유지되어야 하며, 오염방지를 위해 잔해물을 쌓는 것을 엄격히 금지합니다.
6.3. 모든 멸균 장비 및 배양액의 오염을 엄격히 방지합니다. 오염된 제품은 사용을 중단해야 합니다.
6.4. 무균실에는 5% 크레졸 용액, 70% 알코올, 0.1% 클로르메티오닌 용액 등과 같은 작업 농도 소독제를 갖추어야 합니다.
6.5. 무균실은 정기적으로 멸균하고 적절한 소독제로 청소하여 무균실의 청결도가 요구 사항을 충족하는지 확인해야 합니다.
6.6. 무균실에 반입해야 하는 모든 기구, 도구, 접시 및 기타 품목은 단단히 포장하고 적절한 방법으로 멸균해야 합니다.
6.7. 무균실에 들어가기 전에 직원은 비누나 소독제로 손을 씻은 후 완충실에서 특수 작업복, 신발, 모자, 마스크, 장갑으로 갈아입고(또는 70% 에탄올로 다시 손을 닦는다) 무균실에 들어가야 한다. 박테리아 챔버에서 작업을 수행합니다.
6.8. 무균실 사용 전, 무균실 내 자외선 램프를 켜서 30분 이상 조사 및 살균을 해야 하며, 동시에 클린벤치를 켜서 송풍을 해야 합니다. 수술이 완료된 후에는 멸균실을 제때에 청소한 후 자외선으로 20분간 소독해야 합니다.
6.9. 검사 전, 검체의 외부 포장은 손상되지 않은 상태로 유지되어야 하며, 오염을 방지하기 위해 개봉해서는 안 됩니다. 검사 전, 70% 알코올 면봉을 사용하여 외부 표면을 소독하십시오.
6.10. 매 수술마다 음성 대조를 실시하여 무균 수술의 신뢰성을 확인해야 합니다.
6.11. 세균액을 흡수할 때에는 반드시 흡인볼을 이용하여 흡수시켜야 합니다. 빨대를 입으로 직접 만지지 마세요.
6.12. 접종 바늘은 매 사용 전후에 화염으로 소독해야 합니다. 냉각시킨 후 배양물을 접종할 수 있습니다.
6.13. 세균액이 담긴 빨대, 시험관, 페트리 접시 및 기타 기구는 소독을 위해 5% 라이솔 용액이 담긴 멸균 통에 담가두었다가 24시간 후에 꺼내어 헹궈야 합니다.
6.14. 테이블이나 바닥에 세균액을 흘린 경우 즉시 5% 석탄산 용액이나 3% 라이솔을 오염된 부위에 30분 이상 부은 후 처리해야 합니다. 작업복, 모자 등이 세균성 액체에 오염된 경우 즉시 탈의하고 고압증기멸균 후 세탁해야 합니다.
6.15. 살아있는 박테리아가 포함된 모든 품목은 수돗물로 헹구기 전에 소독해야 합니다. 하수구를 오염시키는 것은 엄격히 금지되어 있습니다.
6.16. 멸균실 내 콜로니 수를 매월 확인해야 합니다. 클린벤치를 연 상태에서 내경 90mm의 멸균 페트리 접시 여러 개를 꺼내어 약 45°C로 녹인 영양 한천 배양액 약 15ml를 무균적으로 주입한다. 굳힌 후 30~35℃ 배양기에서 48시간 동안 거꾸로 배양한다. 무균임을 입증한 후 3~5개의 접시를 취하여 작업 위치의 왼쪽, 중간, 오른쪽에 놓습니다. 뚜껑을 열어 30분 동안 노출시킨 후, 30~35°C 배양기에서 48시간 동안 거꾸로 놓아두었다가 꺼내주세요. 조사하다. 클래스 100 청정 구역의 플레이트에 있는 잡균의 평균 수는 1 콜로니를 초과해서는 안 되며, 클래스 10000 청정실의 평균 수는 3 콜로니를 초과해서는 안 됩니다. 한도를 초과하는 경우 반복 검사를 통해 요구 사항이 충족될 때까지 무균실을 철저히 소독해야 합니다.
7. "의약품 위생 검사 방법" 및 "중국 의약품 검사 표준 운영 관행"의 (무균 검사 방법) 장을 참조하십시오.
8. 유통부서 : 품질관리부
클린룸 기술 지침:
무균 환경과 무균 물질을 확보한 후, 알려진 특정 미생물을 연구하거나 그 기능을 활용하기 위해서는 무균 상태를 유지해야 합니다. 그렇지 않으면 외부의 다양한 미생물이 쉽게 섞일 수 있다. 외부의 관련없는 미생물이 섞이는 현상을 미생물학에서는 오염세균이라고 한다. 오염을 방지하는 것은 미생물학 작업에서 중요한 기술입니다. 한편으로는 완전한 멸균과 다른 한편으로는 오염 방지가 무균 기술의 두 가지 측면입니다. 또한, 연구 중인 미생물, 특히 자연에 존재하지 않는 병원성 미생물이나 유전자 조작 미생물이 실험 용기에서 외부 환경으로 빠져나가는 것을 방지해야 합니다. 이러한 목적을 위해 미생물학에는 많은 조치가 있습니다.
무균실은 일반적으로 미생물학 실험실에 특별히 설치된 작은 방입니다. 시트와 유리로 건축할 수 있습니다. 면적은 약 4-5 평방 미터로 너무 크지 않아야하며 높이는 약 2.5 미터 여야합니다. 완충실은 무균실 외부에 설치해야 합니다. 완충실 문과 무균실 문은 공기의 흐름으로 잡균이 유입되는 것을 방지하기 위해 같은 방향을 향하지 않아야 합니다. 무균실과 완충실은 모두 밀폐되어 있어야 합니다. 실내 환기 장비에는 공기 여과 장치가 있어야 합니다. 멸균실의 바닥과 벽은 매끄러워야 하며, 먼지가 쌓이지 않고 청소가 쉬워야 합니다. 작업 표면은 수평이어야 합니다. 멸균실과 완충실 모두 자외선 조명을 갖추고 있습니다. 멸균실의 자외선 조명은 작업 표면에서 1m 떨어져 있습니다. 멸균실에 출입하는 직원은 멸균된 의복과 모자를 착용해야 합니다.
현재 미생물학 공장에는 무균실이 대부분 존재하고, 일반 실험실에서는 클린벤치를 사용하고 있다. 클린벤치의 주요 기능은 층류 공기 흐름 장치를 사용하여 작업 표면의 미생물을 포함한 각종 작은 먼지를 제거하는 것입니다. 전기 장치는 공기가 헤파 필터를 통과한 후 작업 표면으로 유입되도록 하여 작업 표면이 항상 멸균 공기 흐름의 제어 하에 유지되도록 합니다. 또한, 외부와 가까운 측면에는 고속 에어커튼이 있어 외부 세균공기가 유입되는 것을 방지합니다.
조건이 어려운 곳에서는 클린벤치 대신 목재 멸균박스를 사용할 수도 있다. 멸균박스는 구조가 간단하고 이동이 용이합니다. 상자 전면에는 작동하지 않을 때 푸시풀 도어로 막히는 두 개의 구멍이 있습니다. 수술 중에 팔을 뻗을 수 있습니다. 전면 상단에는 유리를 장착해 내부 조작이 용이하다. 상자 안에는 자외선 램프가 있고, 옆면의 작은 문을 통해 식기와 세균을 넣을 수 있습니다.
무균 운영 기술은 현재 미생물학 연구 및 응용 분야에서 중추적인 역할을 할 뿐만 아니라 많은 생명공학 분야에서도 널리 사용되고 있습니다. 예를 들어 형질전환 기술, 단일클론항체 기술 등이 있다.
게시 시간: 2024년 3월 6일